這只是用戶完成的一些周期修改或應用的限制蒸汽滅菌的 液體介質：

• 用戶需要在滅菌時將培養基瓶保存在容器中，以免沸騰過程遍及整個高壓釜。
• 根據制造商的說明，用戶需要在121°C下滅菌15分鐘。用戶找不到將在短時間內死亡的BI。
• 由于介質是熱敏性的，因此用戶不能運行更長的循環時間，如果使用更長的循環時間，則可能不會促進生長。
• 用戶的協議規定只能在15分鐘的121°C周期內運行。
• 用戶已確定1升TSB燒瓶的循環暴露時間。現在，什么時間要裝2升燒瓶？我要加倍時間嗎？

使用液體負載時會出現許多獨特的問題，如果周期是用于硬質貨物或包裹貨物，這些問題永遠不會出現。大多數項目對溫度都不敏感，因此無需擔心BI放置的沸騰或質疑。然而，對于液體負載，無需擔心真空前的去除或蒸汽滲透到多孔負載中。

驗證負載配置：

那么，為什么液體介質滅菌和BI殺傷力會出現這么多問題？實際上，用于解決上述問題的一些方法可能會導致失敗的周期或BI為正的周期。這在很大程度上是由于許多診所，大學或醫院使用的大多數液體負荷/介質循環配置均未經驗證的事實而發生的。驗證負載配置周期可提供“獲得，記錄和解釋結果的書面程序，以證明過程將持續產生符合預定規格的產品”（ISO / TS 11139：2006，定義2、55 2），在滅菌介質中，理想的結果是生產具有某些品質的培養基，例如pH范圍，促進生長的能力和無菌性。

進行液體滅菌驗證：

在對要使用的選定曝光時間/溫度液體介質循環進行驗證時，需要確定從循環開始到介質溫度升至121°C需要花費多長時間。這將記錄為該特定周期所需的“恢復”時間。如果使用1L容量瓶進行此操作，則需要對包含更大容量的循環進行單獨驗證（例如2L容量瓶）。為了確定兩個TS容量為1L的燒瓶的裝載量的“恢復時間”，可以將一個溫度記錄儀放置在每個容量瓶中，以記錄整個周期內介質的溫度。該活動將重復至少兩個以上的循環，每個循環均包含新制備的培養基瓶。所有三個周期的“恢復”時間應該非常相似。例如，如果

現在有數據支持，用一定數量的1L容量的特定培養基的燒瓶，在循環開始后的16分鐘內，培養基的溫度將達到121°C。燒瓶的數量和每個容器的容量及其在高壓釜室內的位置都應記錄在案，并且對于將來使用的其他循環，必須保持相同，除非使用其他放置區域或更少的燒瓶進行了持續驗證。有必要驗證最壞情況的負載，以便能夠預先確定所有其他負載也將在指定的16分鐘“恢復”時間內達到121°C的溫度。

使用數據記錄器：

非常容易使用的熱敏電阻或數據記錄器可在滅菌周期內記錄介質的溫度，可以輕松地放置在實際的介質瓶中。這樣，可以確定被滅菌物的實際溫度。將數據記錄器放置在高壓滅菌器腔室內的架子上不會顯示出介質瓶內部的實際情況。記錄儀實際上必須放置在培養基瓶中。

較長時間運行媒體可能不會對媒體和增長促進能力產生不利影響。畢竟，在35分鐘的循環中花了20分鐘的啟動時間實際上就是在121°C下的15分鐘的循環。如果擔心周期長度，請運行該周期，然后測試介質，并驗證其是否仍按預期運行，并且增長促進沒有受到損害。

在某些情況下，需要執行其他驗證工作的情況是，每個燒瓶運行不同的容量或在一個周期中運行不同數量的燒瓶。運行1L的燒瓶可能需要35分鐘的周期，而幾個2L的燒瓶可能需要更多的時間進行準備，可能需要45分鐘或更長時間。通過使用數據記錄器，可以輕松確定使不同體積的介質達到121°C所需的各種曝光時間。